INDUCTION BY PYROGENAL OF HEMOPOETIC STEM CELLS MOBILIZATION IN PATIENTS WITH INFECTIOUS SYNDROME OF IMMUNOLOGICAL INSUFFICIENCY

Full Text

Резюме. В развитии кратковременного перераспределительного лейкоцитоза, индуцированного внутримышечным введением 100 мкг пирогенала пациентам с инфекционным синдромом иммунологической недостаточности, участвуют CD45+CD34+ - ГСК и CD3+ -, CD4+ - и CD8+ - лимфоциты, содержание которых возрастает почти в два раза. Полученные данные углубляют представления о возможной роли перераспределительного лейкоцитоза в функционировании иммунной системы. 72 Р оссийский Аллергический Журн Индукция пирогеналом мобилизации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с инфекционным синдромом иммунологической недостаточности Введение. Лейкоцитоз рассматривается главным образом как приспособительная реакция, повышающая иммунологическую реактивность и общую резистентность, развивающаяся в ответ на внедрение патогенов и действие на организм неблагоприятных неинфекционных факторов. В механизме формирования реакции большое значение имеет активация оси гипоталамус - ги - пофиз - кора надпочечников по типу классического стресса и стимуляция метаболизма, а в противоинфекционной защите ведущую роль играет фагоцитарная активность нейтрофилов, перемещающихся из крови в ткани [1, 2]. В настоящее время благодаря успехам иммунобиологии назрела необходимость существенного углубления знаний о перераспределительном лейкоцитозе. Так, представляется актуальным исследование субпопуляционного состава лимфоцитов, принимающих участие в лейкоцитарной реакции. Практически не изученным остается и вопрос о возможности присоединения к ней способных к мобилизации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) [3], мигрирующих в очаг воспаления и активно влияющих на развитие инфекционных [4] и им - муновоспалительных процессов [5]. Однако в литературе практически отсутствуют сведения об участии мобилизации ГСК в развитии кратковременного перераспределительного лейкоцитоза. Цель работы. Изучить возможность участия ГСК в формировании кратковременного перераспределительного лейкоцитоза. Материал и методы. Лейкоцитоз, индуцировали внутримышечным введением микробного полисахарида - пирогенала, шести начинающим лечение пациентам с инфекционным синдромом иммунологической недостаточности, страдающим рецидивирующими респираторными инфекциями. Исследование крови и иммунного статуса проводили до и через 24 часа после инъекции препарата. Определение количества CD45+CD34+ -, CD3+ -, CD4+ -, CD8+ -, CD20+ - и CD16+ - клеток в периферической крови проводили на лазерном проточном цитофлуориметре Beckman Coulter (Cytomics FC - 500) с использованием программ сбора и обработки данных Lysis II, CellQuest - PRO и компьютерного оснащения View Sonic (HP, США). Общее количество лейкоцитов и формулу крови изучали рутинным методом. Иммунный статус оценивали по реакции бласттрансформации лимфоцитов крови в ответ на ФГА, естественной цитотоксичности по МТТ - методу, адгезивной активности Т - лимфоцитов методом Е - розеткообразования, поглотительной и бактерицидной активности нейтрофилов в НСТ - тесте, содержанию в сыворотке крови комплемента, циркулирующих иммунных комплексов, С - реактивного белка, ревматоидного фактора и иммуноглобулинов основных классов. В качестве описательных статистик для количественных признаков использовались среднее и среднеквадратическое отклонение ^±s). Результаты обрабатывали, используя критерий Шовине (для выявления аномальных результатов измерений) и непараметрические критерии знаков (G), Вилкоксона (Т) и Вилкоксона - Мана - Уитни (U) для выявления достоверности различий. При интерпретации результатов критической величиной уровня значимости считали 0,05. Результаты и обсуждение. Через 24 часа после внутримышечного введения 100 мкг пирогенала у всех пациентов наблюдалась выраженная температурная реакция. Почти у всех она начиналась через 2 - 4 часа и продолжалась у большинства примерно 24 часа. «Профиль» индуцированной температурной реакции был индивидуальным. Пациенты отличались и по реакции на нестероидный противовоспалительный препарат - ибупрофен. У всех без исключения пациентов в сыворотке крови выявлялся СРБ, что свидетельствует о стабильном развитии у них под влиянием пиро - генала острофазной реакции. Также через 24 часа после введения пирогенала наблюдался выраженный лейкоцитоз. Общее количество лейкоцитов составило 8900±1100/мкл против 5300±700/мкл до инъекции препарата (p<0,01). Повышалось иколичествонейтрофилов (6290±880/мкл после введения и 3240±810/мкл Р оссийский Аллергический Журнал 73 Никольский И.С., Никольская В.В., Тарануха Л.И., Семенова Я. - М.А., Лучинская М.А., Мартынюк М.М., Морозов С.Д., Майборода Я.Р., Герасимчук Е.М. до инъекции препарата; p<0,01) и лимфоцитов (2270±490/мкл против 1580±420/мкл; p<0,05). Существенно возросло количество CD3+ - лим - фоцитов (1490±270/мкл после и 1110±290/мкл до введения; p<0,05), CD4+ - клеток (1110±440/ мкл после и 570±100/мкл до инъекции; p<0,01) и CD8+ - лимфоцитов (620±1200/мкл после и 440±100/мкл до введения; p<0,05). Количество CD45+CD34+ - лимфоцитов в процентном отношении практически не изменялось, а в абсолютном возрастало почти в два раза с 1,8±0,7/мкл до 3,1±1,0/мкл (p<0,05), что свидетельствует о том, что ГСК включены в состав костномозгового резерва и реагируют на раздражитель выходом в циркуляцию вместе с другими участвующими в формировании лейкоцитоза клетками. Причем видно, что для ГСК вряд ли существуют какие - либо механизмы мобилизационного предпочтения, поскольку возрастание их содержания в крови обязано повышению абсолютного количества клеток. Известно, что для определения величины костномозгового резерва используется пиро - геналовый тест. Дополнительное исследование при этом содержания ГСК среди мобилизованных клеток может расширить информационную емкость метода в отношении интенсивности костномозгового кроветворения. Новое качество пирогеналовый тест может приобрести как метод исследования в клинической иммунологии, когда иммунная система изучается до введения препарата (иммунный статус) и через 24 часа после его инъекции - иммунореактивный статус, характеризующий способность определенных звеньев иммунной системы к реализации неспецифической иммунологической реактивности в ответ на стимул Из всех изученных показателей активности иммунной системы через 24 часа после введения пирогенала существенно возрастала только поглотительная активность нейтрофилов (81,7±8,3% после и 67,3±14,0% до введения пи - рогенала; p<0,01), что подтверждает имеющиеся в литературе данные о повышении фагоцитарной активности как основного механизма стимуляции противоинфекционной защиты организма пирогеналом. Необходимо также отметить, что у двух обследованных до введения пирогенала пациен тов в сыворотке крови обнаруживался ревматоидный фактор, а через 24 часа после инъекции тест становился отрицательным, что согласуется с данными литературы об эффективности пирогенала при ревматоидных заболеваниях [6]. Можно предположить, что механизм действия пирогенала включает противодействие срыву иммунологической толерантности и, что вместе с данными по фагоцитозу, позволяет предполагать наличие у пирогенала способности одновременно усиливать иммунный ответ на гетероантигены (патогены) и угнетать аутоиммунные процессы. Заключение. Таким образом, пирогенал индуцирует выраженный лейкоцитоз с существенным увеличением в крови через 24 часа количества CD3+ -, CD8+ - и особенно CD4+ - лимфоцитов. Почти в 2 раза возрастает и численность CD45+CD34+ - ГСК, что может свидетельствовать об их присутствии в костномозговом резерве и способности к мобилизации под влиянием пирогенала из сосудистых ниш. Также препарат стимулирует поглотительную активность нейтрофи - лов. Можно предполагать, что возникновение указанных изменений или их отсутствие после введения пирогенала в значительной мере может рассматриваться и применяться как индивидуализированный тест на неспецифическую иммунологическую реактивность и возможную иммунотерапевтическую эффективность препарата.

About the authors

I S Nikolsky

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

V V Nikolskaya

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

L I Taranukha

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

Ya -MA Semenova

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

M A Luchinskaya

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

M M Martynyuk

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

S D Morozov

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

Ya R Maiboroda

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

E M Gerasimchuk

State Institute of Genetic and Regenerative Medicine National Academy of Medical Sciences of Ukraine

Kiev

References

Supplementary files