THE BALANCE OF T-HELPERS SUBPOPULATIONS IN THE PROGRESSION OF GLAUCOMATOUS OPTIC NEUROPATHY

Abstract

Full Text

Результаты многоцентровых эпидемиологических исследований, проведенных в последнее десятилетие в разных странах, свидетельствуют о значительном росте заболеваемости первичной открытоугольной глаукомой (ПОУГ). По расчетным данным к 2030 году число больных глаукомой может увеличиться в 2 раза, и, оставит около 140 млн. человек [1]. С возрастом число больных увеличивается от 0,1-1,5% в 4045 лет до 10-14% в 75 лет и выше [8]. Глаукомная оптическая нейропатия (ГОН) - основное проявление ПОУГ, мультифакториальный синдром, ведущий к необратимой потере зрения. Иммунная теория развития ПОУГ занимает, на сегодняшний день, одно из ведущих мест, наряду с сосудистой, механической и метаболической теорией. Но, подавляющее большинство работ носит характер одномоментной выборки, оценивается несколько гуморальных медиаторов и не прослеживаются взаимосвязи клеточных и гуморальных факторов [2, 5]. Малоизученной при ПОУГ остается система Т-хелперов (Th), которая играет важную роль в понимании патогенеза заболевания. Т-лимфоциты-хелперы 1-го типа продуцируют гамма-интерферон, ИЛ-2 и ФНО-альфа, активируют макрофаги, NK-клетки, созревание цитотоксических Т-лимфоцитов-киллеров, обеспечивая преимущественное развитие клеточного иммунного ответа. Т-лимфоциты 2-го типа -і продуцируют ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10 и ИЛ-13, которые отвечают за развитие гуморального ответа, в том числе, за продукцию IgE. Гамма-интерферон подавляет функционирование ^ 2-го типа. Со своей стороны, ТЬ 2-го типа могут продуцировать ИЛ-10, который является супрессивным интерлейкином и подавляет функцию ТЬ 1-го типа. Доказано, что функция Thl преобладает при развитии множественного (рассеянного) склероза, инсулинозависимого сахарного диабета, аутоиммунного тиреоидита, болезни Крона, а функция ТЬ2 преобладает при трансплантационной толерантности, идиопатическом легочном фиброзе, прогрессирующем системном склерозе, при аллергической патологии [8]. Субпопуляция Th17 продуцирует активно ИЛ-17, 21,22, что играет роль в поддержании хронического аутоиммунного ответа. Преобладание этой субпопуляции происходит при бронхиальной астме, системной красной волчанке, псориазе [7, 8]. Целью нашей работы было выявить взаимное влияние субпопуляций Т-хелперов при прогрессировании ГОН, для дальнейшей разработки таргетной терапии в различных стадиях. Обследованы 133 человека с ПОУГ I-III стадий, из них в возрасте до 59 лет - 32 (24%) человека, старше 60 лет - 101 (76%) человек. Количество пациентов с I стадией составило 39 (29,3%) человек, со II стадией 56 (42,1%) человек и с III стадией - 38 (28,6%) человек. Стадии и обсле Р оссийский .^Аллергический ^Журнал 187 Хохлова А.С., Догадова Л.П., Филина Н.В., Овчинникова О.В., Купчина Е.А., Иванис В.А. дования выполнялись согласно «Национального руководства по глаукоме» [1]. В слезной жидкости исследовалась концентрация ИЛ-ф, ИЛ-6, ИЛ-2, РРИЛ-2, ИЛ-17, IFN-гамма, ИЛ-10, ИЛ-4, TGF-бета! TGF-бета2, ФНО-альфа, ФНО-бета, методом сэндвич-варианта твердофазного имму-ноферментного анализа, с использованием специфических тест- систем «R&D Diagnostics Inc.» (USA) согласно прилагаемых инструкций. Учет результатов проводили с помощью иммунофер-ментного анализатора «Multiscan» (Финляндия). Расчет количественных параметров проводили путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы. Количество выражали в пг/мл или нг/мл. Анализ провоспалительных цитокинов в слезной жидкости у пациентов с разными стадиями ПОУГ выявил, что содержание ИЛ-1 бета наиболее высокое при III стадии ПОУГ (13,20 (3,22; 37,19) пг/мл, р1-3<0,001), наименьший уровень зафиксирован у пациентов с I стадией ПОУГ (р<0,05). Исследование локальных показателей ИЛ-6 у пациентов с ПОУГ III стадией определило его достоверное повышение по сравнению с I, II стадией и группой контроля (р<0,05). При оценке содержания ИЛ-2 выявлено его достоверное увеличение только у пациентов со II стадией ПОУГ(16,19 (8,46; 30,50) пг/мл, р2-3<0,001) у пациентов с I и III стадией уровень данного цитоки-на не отличался от контрольных значений. Одинаковая динамика выявлена по уровню ИЛ-17 и ИЛ-22, их концентрация резко повышалась при I стадии и снижалась при II и III стадии ПОУГ. При оценке уровня противоспалительных цитокинов у пациентов с ПОУГ в зависимости от стадии выявлено, что содержание IL-10 достоверно выше у пациентов с I стадией, наименьший уровень зафиксирован у пациентов со II стадией (3,90 (6,3; 14,31) пг/мл, р2-3>0,05). При анализе показателей ИЛ-4 у пациентов с ПОУГ III стадии выявлено его достоверное повышение по сравнению с I и II стадиями и группой контроля (р<0,05). При оценке показателей ТФРбета1 установлено его достоверное понижение во всех исследуемых группах, причем самое низкое значение выявлено у пациентов с III стадией ПОУГ. Выявлен высокий уровень ТФРбета2 у пациентов с ПОУГ, особенно при III стадии (р<0,001). Таким образом, у пациентов с ПОУГ на I стадии зарегистрирована гиперпродукция ИЛ-17, ИЛ-22 и ИЛ-10, умеренное увеличение ИЛ-ф, ТФРбета2 на фоне дефицита ИФНгамма и снижения ТФР-бета1. У этой категории пациентов превалирует гиперактивациия Т-хелперов 17 типа. При II стадии ПОУГ отмечено увеличение локального уровня Th 1 маркерного цитокина - ИФН-гам-ма, повышение содержания ИЛ-1бета, ИЛ-2 и его растворимого рецептора. При II стадии ПОУГ, выявлен Th 1 тип ответа с угнетением противовоспалительной активности клеток врожденного иммунитета. В III стадии ПОУГ зафиксировано нарастание как ранних, так поздних провоспали-тельных цитокинов - ИЛ-1бета и ИЛ-6, снижение ИЛ- 17, ИЛ-22 и ИФНгамма. Выявлено относительное снижение (до референсных величин) локальной концентрации ИЛ-2 и его растворимого рецептора, что может свидетельствовать об истощении их продукции или повышенном образовании соответствующих комплексов. Локальный профиль цитокинов при ПОУГ отличается выраженным провоспалительным профилем с переключением типов иммунного ответа с Th 17 и Th 2 у пациентов с I стадией ПОУГ на Th 1 при II стадии ПОУГ и Th 2 у пациентов с III стадией ПОУГ. Эти данные позволяют предполагать различные иммунные реакции при развитии ПОУГ, активацию в раннюю стадию аутоиммунных процессов, затем, в развитой стадии - клеточного иммунитета, и, в завершении процесса, гуморального иммунитета при 3 стадии. Полученные результаты могут служить основой диагностики прогрессирования ГОН и таргет-ной иммунной терапии при различных стадиях ПОУГ.