MOLECULAR DIAGNOSTICS - THE POSSIBILITY OF PROGNOSIS OF ALLERGEN-SPECIFIC IMMUNOTHERAPY

Abstract

Full Text

Важнейшими аспектами молекулярной диагностики являются, как способность выявлять причинную молекулу и отличать специфические молекулы от маркеров перекрестной реактивности, так и возможность определять структуру аллергенных протеинов, ответственных за сенсибилизацию. Наибольшую актуальность данный диагностический инструмент приобретает при выборе аллергена для аллер-ген-специфической иммунотрепаии (АСИТ) по-лисенсибилизированному пациенту. Как известно, при выборе аллергена необходимо учитывать совокупность анамнестических данных: наибольшая продолжительность и выраженность симптомов в году, основное влияние на качество жизни, уточнение периода, когда труднее всего избежать влияния аллергена. [1, 2, 3]. Наиболее значимый аллерген не должен выбираться по результатам наибольшей реактивности кожных аллергопроб или по самому высокому уровню специфического IgE. Выявление аsIgE на главные и второстепенные компоненты аллергенов, согласно концепции молекулярной диагностики, помогает прогнозировать эффективность АСИТ [4, 5]. Опыт использования молекулярной диагностики при атопических заболеваниях, уточнение места нового диагностического инструмента, определение клинических ситуаций, когда она может быть полезной, требует дальнейшего обсуждения. Материалы и методы. Проведено 130 исследований по идентификации повышенного уровня специфических Ig E (asIgE) к молекулярным компонентам у больных с респираторной аллергией (бронхиальной астмой, N = 66 и аллергическим ринитом, N =64). Определение asIgE к рекомбинантным и натуральным компонентам (Phadia/Termoscientific) проводилось c использованием анализатора «Phadia-100» (Швеция, Phadia/Termoscientific) - к патогенреактивным протеинам пыльцы берёзы - rBet v 1, тимофеевки - rPhl p1, rPhl p 5b, главным молекулярным компонентом клещей домашней пыли - цисте-инпротеазеnDer p1, белку семейства NPC2 - rDer p2. Также проводились исследования на определение уровней asIgE к минорным компонентам (профилинам) - тимофеевки -rPhl p7, rPhl p 12; берёзы - rBet v 2; rBet v 4 и минорному молекулярному компоненту - белку клещей домашней пыли - тропомиозину (rDer p 10). Согласно инструкции производителя, результат трактовался - уровень вне детекции<0,35 kUA/l; очень низкий уровень антител - 0,35-0,7 kUA/l; низкий уровень антител 0,7-3,5 kUA/l; положительный ( средний) уровень - 3,5-17,5 kUA/l; высокий уровень - 17,550 kUA/l; очень высокий уровень - 50-100 kUA/l; уровень выше предела детекции>100 kUA/l. Результаты исследований. Панельные молекулярные исследования антител к компонентам пыльцы берёзы проведены у 62 больных. Повышенный уровень специфических антител к главному молекулярному компоненту rBet v 1 пыльцы берёзы выявлен в 87 % случаев (результат <0,35 kUA/l - у 9,6 % больных; уровень 1 класса не детектировался; уровень 2 класса составил 118 оссиискии .^Аллергический ^Журн Молекулярная диагностика - возможности прогнозирования эффективности асит 16,1%; 3 класса - 3,2%; 4 класса - 35,4%; 5 класса - 19,3%; 6 класса - 19,3%). Сенсибилизация к минорным молекулярным компонентам пыльцы берёзы выявлена у 16,1% больных. Среди этой группы уровень антител 3 класса имел место у 9,6%; 4 класса - у 3,2%; уровень 5 класса - у 3,2 %. Т.о., полученные данные свидетельствуют, что преобладающим уровнем антител к мажорному компоненту берёзы rBet v 1 был очень высокий и уровень выше предела детекции (> 100 kUA/l), а преобладающим уровнем антител к минорному компоненту rBet v 2 была сенсибилизация среднего уровня. Панельные молекулярные исследования сенсибилизации к пыльце тимофеевки проведены у 44 больных. Повышенный уровень специфических антител к главным молекулярным компонентам пыльцы тимофеевки (rPhl p1, rPhl p 5b) выявлен у 80 % больных (результат <0,35 kUA/l - в 8,3% случаев; уровень 1 класса также составил 8,3%; 2 класса - 16,6%; 3 класса - 33,3%; 4 класса - 24,0%; 5 класса - 24,0%). Т.о., преобладающим уровнем сенсибилизации к мажорным компонентам тимофеевки были реакции среднего и высокого уровня. Сенсибилизация к минорным молекулярным компонентам пыльцы (rPhlp7 rPhl p 12) тимофеевки выявлена у 16,1 % больных (уровни 1 и 2 класса не определялись, уровень 3 класса выявлен в 8,3%, 4 класса - в 8,3 %). Преобладающей сенсибилизацией к минорным компонентам тимофеевки была сенсибилизация среднего и высокого уровня. Панельные молекулярные исследования сенсибилизации к молекулярным компонентам клещей домашней пыли проведены у 24 больных. Повышенный уровень специфических антител к главному молекулярному компоненту - цистеинпротеазе (nDer p1) выявлен у 66,6 % (результаты <0,35 kUA/l не выявлялись, уровень 1 класса составил 8,3%; 2 класса - 8,3%; 3 класса - 8,3%; 4 класса - 25,0%; 5 класса - 8,3%; 6 класса - 8,3%). Повышенный уровень специфических иммуноглобулинов ко второму главному молекулярному компоненту клещей домашней пыли-я-дерному белку NPC 2 (nDer p2) выявлен у 91,6% больных (результат <0,35 kUA/l не выявлен, уровень 1 класса составил 8,3%; 2 класса - 8,3%; 3 класса - 16,6%; 4 класса - 33,3%; 5 класса - 25,0%). Уровни 6 класса не выявлялись. Т.о., исследование антител к главным молекулярным компонентам клещей домашней пыли показало, что для главного компонента цистеинпротеазы преобладающим был 4 - высокий уровень специфических антител, а для второго главного аллергокомпонента (ядерный белок-NPC 2) преобладающими были высокий (уровень 4) и очень высокий (уровень 5) уровни антител. Сенсибилизация к молекулярному минорному компоненту клещей домашней пыли - тропомиозину, (nDer p10) выявлена у 8,3 % больных. Обсуждение и выводы. Согласно концепции молекулярной диагностики, эффективность АСИТ терапии прогнозируется высокой при повышенном уровне аsIgЕ на главные компоненты и отсутствии антител на минорные компоненты, при повышенном уровне одновременно на главные и минорные белки АСИТ прогнозируется недостаточно эффективной. Полученные данные свидетельствуют о том, что при оценке эффективности АСИТ необходимо также учитывать и уровень антител - максимальная эффективность прогнозируется при очень высоком уровне [5] и уровне выше предела детекции (6 класс, > 100 kUA/l) - согласно этой концепции наилучшие результаты будут достигнуты при специфической терапии группы больных с повышенным уровнем антител к мажорному молекулярному компоненту березы (rBet v 1) и главному аллергокомпоненту клещей домашней пыли (ядерный белок-NPC 2) в сочетании со средним и ниже классом уровня минорных компонентов.