EVALUATION OF LOCAL IMMUNITY IN INFLAMMATORY GENESIS STERILITY

Abstract

Full Text

Бесплодным принято считать брак, в котором при регулярной половой жизни и отсутствии контрацепции беременность не наступает в течение 1 года. Частота бесплодия в развитых странах составляет 15-20%, из них на женское бесплодие приходится 50-60%. Наиболее распространёнными формами женского бесплодия являются трубно-перитонеальная (35-60%), эндокринная (ановуляторная) (30-40%) формы, генитальный эндометриоз (25%) [2, 5, 6]. Хронический воспалительный процесс органов гениталий является одной из важных причин бесплодия. Длительная и часто бессимптомная персистенция инфекционных агентов в орга низме приводит к выраженным изменениям в структуре органов гениталий [1, 2]. В условиях постоянного присутствия повреждающего агента не происходит завершения заключительной фазы воспаления - регенерации, нарушается тканевой гомеостаз и формируется целый каскад вторичных повреждений. Вызванные нарушения приводят к ишемии и гипоксии ткани [3, 4, 5]. Активированные макрофаги в очаге воспаления являются источником активных форм кислорода и перекиси водорода и запускают процесс перекис-ного окисления липидов и повреждение клеточных мембран. Постоянная антигенная стимуляция иммунокомпетентной системы вызывает её Р оссийский .^Аллергический ^Журнал 85 Маликова Д.Б., Курбанов Д.Д., Мусаходжаева Д.А. функциональную перегрузку и развитие вторичных иммунодефицитов. Выявлены существенные изменения параметров иммунитета у больных с хроническим сальпингитом в виде активации клеточных и гуморальных провоспалительных реакций, изменения количества Т-лимфоцитов, NK-клеток, макрофагов, титров IgM, IgA, IgG [3, 4, 6]. Наряду с морфологическими изменениями нарушение иммунных реакций на локальном уровне могут явиться пусковыми механизмами развития бесплодия [4, 6]. Целью работы явилась оценка параметров локального иммунитета у женщин с хроническими заболеваниями органов гениталий в зависимости от наличия инфекционных факторов. Материал и методы исследования. Обследованы 84 женщины с бесплодием в возрасте от 18 до 35 лет, обратившиеся в женскую консультативную поликлинику №7 г. Андижана. Диагноз хронического воспаления органов гениталий у всех больных был поставлен на основании клинико-инструментального обследования. Верификация инфекций, передающихся половым путем (ИППП), ставился на основании обнаружения в диагностическом титре специфических антител к TORCH-инфекциям класса Ig G и IgM методом ИФА. Обследованные женщины были разделены на 2 группы: I группа - 48 женщин, у которых диагностировали сальпингоофарит. У 36 пациенток, составивших II-ю группу, сальпингоо-фарит сочетался с другими гинекологическими заболеваниями: хроническим эндометритом, эн-доцервицитом и неспецифическим кольпитом. Контрольную группу составили 30 соматически здоровых женщин репродуктивного возраста, в анамнезе которых отсутствовали гинекологические заболевания. Иммунологические исследования проводились изучением количественного определения лимфоцитов с фенотипом CD3, CD4, CD8, СD16, CD95 с помощью моноклональных антител серии LT (Ин-т иммунологии, ТОО «Сорбент», Москва, Россия) в цервикальной жидкости в реакции поверхностной иммунофлюоресценции. Для определения уровня ЦИК использовали тест-набор Ташкентского малого предприятия «Нихол». Метод основан на нефелометрии различной растворимости мономеров иммуноглобулинов в составе иммунных комплексов при наличии в среде полиэтиленгликоля (ПЭГ-6000). Фагоцитарная активность нейтрофилов оценивалась по поглощению лейкоцитами латексных частиц. Статистическая обработка полученных дан ных включала вычисление среднего арифметического значения показателя и стандартных ошибок по методу Стьюдента. Результаты и их обсуждение. Изучение соматического анамнеза показало, что наиболее распространённой патологией оказалась анемия различной степени тяжести, которой страдали 59% женщин I группы и 64,3% - II группы. У женщин II группы заболевания встречались чаще, чем у женщин I группы. Изучение репродуктивного анамнеза показало, что у 28 женщин II группы было 84 беременностей, из которых 10 (11,9%) закончились своевременными родами, 5 (5,9%) преждевременными родами, 3 (3,6%) искусственным абортом и 66 (78,5%) самопроизвольным абортом. Анализ полученных данных позволяет сделать вывод, что у женщин 2-й группы большое число перенесённых абортов могли стать причиной развития хронических воспалительных процессов в малом тазу. Из гинекологических заболеваний преобладали нарушение менструального цикла. По данным анамнеза болевой синдром наблюдался несколько чаще у пациенток II-ой группы, также как и дисменорея, имевшая место у каждой 4-й больной этой же группы. Анализ результатов иммунологического исследования показал, что у женщин с 1-й группы в цервикальной слизи наблюдалось некоторое угнетение активности локального иммунитета. Уровень CD3+ и CD4+-лимфоцитов был достоверно снижен, как в I группе, так и у пациенток II группы (P<0,01). Однако у пациенток с сопутствующими гинекологическими заболеваниями наблюдался более глубокий дефицит - уровень Т-лимфоцитов составил в среднем 43,4 ± 1,1% (P<0,01), а в I группе - 47,8 ± 1,2% против 55,2 ± 1,3% в контроле (P<0,05). Уровень CD4+-лим-фоцитов был сниженным в 1,3 раза у женщин с хроническим сальпингоофаритом (P<0,05), а у женщин II группы наблюдалось достоверное снижение в 1,67 раза (13,9 ± 0,8%) по сравнению с данными контрольной группы (24,3 ± 1,0%) (P<0,01). Одним из важнейших механизмов, вовлеченных в защиту от повреждающего действия антигенов различных микроорганизмов, является определённая субпопуляция Т-клеток - Т-супрес-соров/цитотоксических лимфоцитов, а именно, увеличение их количества и активности. По сообщениям различных авторов, большинство лимфоцитов в цервикальной жидкости являются CD8+-клетки, количество которых превалирует 86 Р оссийский .^Аллергический ^Журнал Оценка локального иммунитета при воспалительном генезе бесплодия над CD4+-клетками [3, 5]. У женщин I группы количество CD8+-клеток был на уровне контрольных значений, в то время как у женщин II группы уровень CD8+-лимфоцитов достоверно снизился - 13,9 ± 0,8% по сравнению с показателями контрольной группой 27,6 ± 1,09%, (Р<0,05). Хронический сальпингоофарит характеризовался повышенным содержанием лимфоцитов с молекулой апоптоза - CD95+-лимфоцитов. Максимальное содержание наблюдалось у женщин с хроническим сальпингоофарит и с сопутствующими гинекологическими заболеваниями - 31,8± 1,3% против 19,8 ± 1,1% в контрольной группе (Р<0,01), которое косвенно может свидетельствовать об угнетении процессов апоптоза при данной форме заболевания. Молекула CD16+ в лимфоцитарном гейте экспрессируется, в основном на NK-клетках, а содержание клеток, экспрессирующих её в цервикальной слизи у женщин, составляющих контрольную группу, в среднем было 11,3 ± 0,5%, а в группе женщин с хроническими заболеваниями этот показатель характеризовался достоверно сниженным содержанием (Р<0,05), в то время как у женщин 2-й группы число CD16+-клеток было сниженным почти в два раза (Р<0,01). Одной из наиболее важных функциональных характеристик нейтрофилов является их фагоцитарная активность. У женщин с сальпингоофо-ритом широко распространена функциональная недостаточность фагоцитов. Наши исследования показали, что процентное содержание фагоцитарной активности нейтрофилов в цервикальной слизи женщин первой группы характеризуется достоверным снижением (Р<0,01). Образование циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в организме является одним из компонентов нормального иммунного ответа, а также играет важную роль в санации организма от возбудителей заболевания [4, 6]. Повышение концентрации ЦИК являются индикаторами антителозависимой цитотоксичности и повреждения тканей при ряде патологических состояний [5]. Уровень ЦИК в цервикальной слизи был повышенным в 2 раза у женщин I группы (P<0,001) и в 2,6 раза у женщин II группы (P<0,001) в сравнении с уровнем ЦИК у практически здоровых женщин. Увеличение концентрации ЦИК, по-видимому, отражает, с одной стороны, рост антигенной нагрузки, а с другой - эффективность работы систем комплемента и мононуклеарных фагоцитов, контролирующих содержание ЦИК [4, 5]. При хроническом сальпингоофорите в цер викальной слизи наблюдаются существенные изменения многих параметров иммунной системы, причем более выраженные при сопутствующих гинекологических заболеваниях. Установлено достоверное снижение содержания CD4+- и CD8+Т-лимфоцитов. Иммунодефицитное состояние связано с существенными нарушениями в системе неспецифической защиты, являющейся первой на пути проникновения инфекции. Снижение числа CD16+-клеток в основной группе по сравнению с их содержанием у здоровых женщин объясняется следующим - воздействие бактериальных антигенов ведёт к синтезу провоспали-тельных цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8), которые активируют NK [4]. Выраженное снижение NK-клеток не соответствует этим данным. В то же время в исследованиях [6] показано, что при воспалительных процессах через усиление синтеза ИЛ-1 индуцируется активация обмена арахи-доновой кислоты с накоплением ее метаболитов, которые оказывают ингибирующее действие на генерацию NK-клеток, что может объяснить полученные данные. Данный факт приобретает особую значимость при нарушении процессов апоп-тоза при наличии хронического воспалительного процесса в малом тазу. Выявленные клинико-иммунологические особенности хронических заболеваний органов гениталий отражают характер и глубину хронического воспаления.