HE LEVEL OF PROINFLAMMATORY CYTOKINES IN WOMEN WITH POLYCYSTIC OVARY SYNDROME

Abstract

Full Text

Существующие теории развития синдрома поликистозных яичников (СПКЯ), отображая изменения, обнаруженные у большинства больных [1, 3], не объясняют, что же является первичным нарушением при развитии этой патологии. В свете имеющихся данных о возможной роли внутрияичниковых факторов роста в патогенезе СПКЯ, а также возможном наследовании этой патологии логично предположить, что в основе СПКЯ могут лежать генетические дефекты, приводящие к патологическим изменениям в женских гонадах. Одним из яичниковых факторов, напрямую связанным с генотипом плода, и определяющим развитие гонад в раннем эмбриональном периоде, является Антимюллеров-ский фактор (АМФ). В эмбриональном периоде АМФ вырабатывается исключительно клетками Сертоли (т.е. только гонадами мужского плода). Гранулезные клетки яичников начинают вырабатывать АМФ только после рождения, но продукция АМФ в яичниках происходит на протяжении всего репродуктивного периода жизни женщины [3, 4, 6]. Эти наблюдения позволяют предположить наличие регуляторного влияния АМФ на функцию яичников и обосновать теоретически возможные последствия гиперпродукции АМФ в фолликулярном аппарате яичника. Иммунная система функционирует в тесной взаимосвязи с эндокринной. Не вызывает сомнения тот факт, что эндокринная система контролирует иммунологическую реактивность организма, с другой стороны, убедительно аргументировано афферент ное влияние иммунной системы на эндокринные функции. Эндокринная регуляция иммунных функций реализуется с помощью гормонов. В свою очередь подавляющее большинство цито-кинов, вырабатываемых иммунокомпетентными клетками, регулируют эндокринные функции. Согласно современным представлениям, присутствующие в тканях яичника клетки иммунной системы являются потенциальными модуляторами функций яичника и наряду с клетками гра-нулезы и теки осуществляют своё регулирующее действие через продукцию цитокинов. Цитоки-ны, как универсальные посредники, реализуют взаимодействие иммунной системы с другими системами организма, обеспечивающими сохранение гомеостаза. Было установлено, что TNFa, равно как и IL-1, редуцирует базальную секрецию тестостерона и активность ключевых ферментов стероидогенеза. Xiong Y. и Hales D. (1993) на гранулезных клетках яичника обнаружили сайты связывания TNFa и выявили, что сам цитокин блокировал фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) и инсулин-индуцированный синтез прогестерона, ингибировал ароматазную активность и биосинтез прогестерона, эстрона и эстрадиола [1, 3]. Оказалось, что способностью ингибировать ароматазу обладает и IL-1 [2]. Можно полагать, что нарушение репродуктивной функции при патологии половой сферы может быть обусловлено топической гиперпродукцией провоспалитель-ных цитокинов. Цель исследования - определить взаимосвязь 58 Р оссийский .^Аллергический ^Журнал Уровень провоспалительных цитокинов у женщин с синдромом поликистозных яичников уровней провоспалительных цитокинов (TNFa, IL-1ß, IL-6) и антимюллеровского фактора (АМФ) у практически здоровых женщин и при СПКЯ. Материалы и методы. В исследование были включены 56 женщин с СПКЯ, которые наблюдались амбулаторно в консультативной поликлинике НИИ Эндокринологии МЗ РУз. Контрольную группу составили 18 практически здоровых женщин репродуктивного возраста с нормальным менструальным циклом. Диагноз СПКЯ был установлен на основе Ротердамского консенсуса, т. е наличие двух из трех критериев: олиго- или анавуляция, клинические признаки гиперандрогенизма и/или поликистоз яичников. Всем пациенткам было проведено клиническое обследование, которое включало определение индекса массы тела (ИМТ), отношения объёма талии к объёму бедра (ОТ/ОБ), гирсутное число. Оценку гирсутизма (патологическое оволосение в андрогензависимых участках лица, туловища и конечностей) проводили по шкале Ферримана и Голлвея. Уровень АМФ (тест-системы - Immunotech, BCCO), провоспалительных цитокинов (IL-1 ß, IL-6 и TNFa) (тест-системы - ООО «Цитокин», С.-Петербург) определяли в сыворотке крови методом ИФА. Всем пациенткам проводилось определение в крови лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), тестостерона (Т) на 5 (пролиферативная фаза) и 21 (секреторная фаза) день самостоятельного или индуцированного менструального цикла. Уровень гормонов определяли радиоиммунологи-ческим методом с использованием стандартных наборов IMMUNOTECH (Чехия). Математическую обработку данных проводили методами вариационной статистики с помощью стандартных математических пакетов прикладных программ с определением средней, её ошибки, критерия t Стьюдента. Результаты и обсуждение. Отражением работы репродуктивной системы является нормальный менструальный цикл (МЦ), который в среднем длится 28 дней. Основной функцией МЦ является развитие фолликулов, в которых созревает яйцеклетка. Созревание яйцеклетки - очень сложный процесс, при котором принимают участие иммунная и эндокринная системы. На каждом этапе МЦ происходит изменение синтеза определенных гормонов при активном участии параметров иммунной системы. Исследование по изучению уровня АМФ у женщин, составивших контрольную группу, в зависимости от фазы менструального цикла показало, что в сыворотке крови концентрация АМФ достоверно выше в пролиферативную фазу (P<0,01). Как известно, пролиферативная фаза характеризуется преобразованиями, возникающими под влиянием эстрогенов, а секреторная фаза отражает изменения, обусловленные воздействием прогестерона. Снижение уровня АМФ в секреторной фазе указывает, что лютеинизация фолликула оказывает отрицательный эффект на синтез АМФ гранулезными клетками. При изучении уровня цитокинов в сыворотке крови у практически здоровых женщин было выявлено, что в пролиферативной фазе уровень IL-6 составил в среднем 32,9 ± 1,96 пг/мл, в этот период наблюдается пик синтеза ФСГ, а в секреторной фазе наблюдалось достоверное снижение данного ци-токина - 18,6 ± 1,6 пг/мл. (P<0,01). Нужно отметить, что секреция АМФ прекращается, когда наступает атрезия фолликула. Секреторная фаза характеризуется повышенным уровнем ЛГ (7,25 ± 0,9 мкЕД/мл против 5,15 ±1,0 мкЕД/мл), которая сопровождается повышением IL-1ß (34,6 ± 1,76 пг/мл против 22,4 ± 1,9пг/мл) и TNFa (32,9 ± 2,1пг/мл против 25,7 ± 2,5 пг/мл) с включением процесса апоптоза. TNFa, IL-1ß и IL-6 оказывают плейотропный эффект на функцию яичников. Эти цитокины найдены в фолликулярной жидкости, предположительно их продуцируют гранулезные клетки [1, 4]. Гонадотропины находятся во взаимосвязи с секрецией цитокинов. Уровень и количественное соотношение цитокинов меняется в зависимости от фазы фолликулогенеза. Процесс овуляции сопряжён с разрывом здоровой ткани на поверхности яичника и происходит в присутствии каскада воспалительных медиаторов, включающих про-воспалительные цитокины. С этой точки зрения разрыв овуляторного фолликула в секреторной фазе напоминает воспалительную реакцию, которая может инициироваться и опосредоваться с участием лейкоцитов. Установлено, что под влиянием лютеинизирующего гормона происходит аккумуляция IL-1ß в клетках Лейдига [1]. Уровень АМФ положительно коррелирует с уровнем IL-6 и ФСГ. Таким образом, у практически здоровых женщин репродуктивного возраста Р оссийский .^Аллергический ^Журнал 59 Камалов З.С., Музафарова С.А., Хайдарова Ф.А. уровень АМФ и цитокинов меняется в зависимости от фаз МЦ, т.е. в зависимости от гормонального фона. Анализ результатов исследования показал, что у пациенток с СПКЯ уровень АМФ и цитокинов достоверно (P<0,001) повышен по сравнению с данными контрольной группы, и, что особенно важно отметить, нет колебаний в зависимости от фаз менструального цикла. При СПКЯ, характеризующимся нарушением фолликулогенеза, наблюдается повышенный синтез провоспалитель-ных цитокинов. IL-1 вовлечен в многочисленные нейрогуморальные связи гипофиз- гипоталами-ческого узла [2, 6]. Анализ результатов исследования уровня IL-1ß у женщин с СПКЯ показал, что синтез данного цитокина повысился в 3 раза по сравнению с данными контрольной группы (P<0,001). IL-6 ключевой медиатор воспаления. Более 30% циркулирующего IL-6 синтезируется в жировой ткани. Циркулирующий IL-6 - повышается с увеличением ИМТ, что связано со снижением инсулин-чувствительности тканей. Пропорционально нарастанию массы жировой ткани в крови увеличивается концентрация IL-6. Нами было проведено исследование по изучению взаимосвязи уровней АМФ и IL-6 c количеством антральных фолликулов у женщин с СПКЯ в зависимости от типа МЦ. Проведённые нами исследования показали, что увеличение числа растущих фолликулов отражаются в 2х-3х-кратном увеличении уровня АМФ. В процессе анализа полученных результатов нами был выведен индекс цитокиновой регуляции IL-6/АМФ, который составил в среднем у женщин контрольной группы 8,7 ± 1,1. Уровень цитокинового индекса снижался по мере возрастания уровня АМФ. Так, у пациенток с СПКЯ и нормальным МЦ соотношение IL-6MM® был ниже контрольных значений в 2,2 раза (P<0,05), а по сравнению с пациентками с олигоменореей этот индекс был ниже в 3,0 раза (P<0,001). А у женщин с аменореей соотношение IL-6MM® было ниже в 4,4 раза (P<0,001). Однако, следует отметить, что среди пациенток с СПКЯ с нормальным МЦ у 4 женщин (13,3%) цитокиновый индекс был выше 8. Т.е. у этих женщин уровень АМФ был в пределах нормальных колебаний. Секреция АМФ уменьшается в фолликулах с увеличением размера и уже исчезает в фолликулах больше 8 мм, где только отмечаются очень слабые следы АМФ. Эта секретирующая модель предполагает, что, возможно, АМФ может играть роль в начале отбора фолликулов и в селекции доминантного фолликула. Анализ результатов исследования показал, что уровень АМФ у женщин с СПКЯ с регулярным менструальным циклом повышен в 4,2 раза (P<0,00 1), у женщин с олигоменореей - более чем в 6 раз (P<0,001), а при аменореи - в 9,86 раза (P<0,001). АМФ, IL-1ß, IL-6 и TNFa играют важную роль в регуляции функции яичников в репродуктивном периоде. Продукция их гранулезными клетками зависит от стадии развития фолликула, т.е. изменения внутри растущих фолликулов и выработка АМФ, IL-6 и TNFa взаимосвязаны. Таким образом, АМФ, IL-1ß, IL-6 и TNFa можно рассматривать как один из возможных внутрифоллику-лярных факторов, играющих роль в механизме селекции доминантного фолликула. Позитивная корреляция между концентрацией АМФ и числом фолликулов у женщин с СПКЯ подтверждается в настоящем исследовании, но не ясно, играет ли АМФ регуляторную роль в развитии фолликула или увеличение концентрации АМФ является следствием увеличения числа антральных фолликулов при СПКЯ. Хотя АМФ показан как ингибитор отбора фолликулов и ФСГ стимулирующего роста фолликулов в исследованиях над животными и клеточных культурах, точная роль АМФ в регуляции развития человеческого фолликула остаётся для дальнейших исследований.