CYTOKINE PROFILE AT CHILDREN WITH ATOPIC DERMATITIS

Abstract

Full Text

Атопический дерматит (АтД) является хроническим воспалительным кожным заболеванием. Основными характеристиками АтД являются выраженный кожный зуд, рецидивирующее течение и, как правило, начало в раннем возрасте. У детей распространенность АтД составляет 15-30%, причем у 45% больных заболевание развивается в течение первых 6 мес. жизни [1], только у 16,8% взрослых больных дебют заболевания случается в подростковом возрасте [2]. Развитие кожного воспалительного процесса при атопическом дерматите является результатом сложного взаимодействия окружающей среды, инфекционных агентов, дефектов кожного барьера и иммунологических механизмов. Одну из ключевых ролей в регуляции иммунопатологических реакций играют цитокины и хемокины. Роль некоторых из них, таких как ИЛ 4, ИЛ 5, ИЛ 12, ИФН у изучена достаточно хорошо. В то же время, участие целого ряда Т-клеточных цитоки-нов, таких как ИЛ 17, ИЛ 22, ИЛ 31 пока ещё изучено недостаточно, хотя в последнее время появляются работы по изучению их роли при АтД, так в ряде исследований показана ключевая роль в регуляции иммунопатологических реакций ци-токинов, продуцируемых Th-17 и Th-22 клетками [3, 4, 5, 6]. Исследование нарушений цитокинового профиля является крайне перспективным направлением современной иммунологии, так как выявленные изменения могут служить мишенью для разработки новых методов лечения АтД. Вышеизложенные механизмы обуславливают цель данного исследования - установить особен ности спектра цитокинов у дтей с атопическим дерматитом. Материалы и методы. В исследование было включено 64 ребёнка с АтД, в возрасте от 1 года до 16 лет, медиана и верхняя и нижняя квартили (Me [Q1; Q3] : Me - 4,5 [Q1 - 3,0;Q3 - 8,0] лет, наблюдавшихся в 2014-2016 гг. в отделении аллергологии и клинической иммунологии Московского научного клинического института ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова. 11 детей (Ме-5,2 [Q1 - 3,2;Q3 - 9,0]) без аллергических заболеваний и отсутствием IgE-опосредованной сенсибилизации составили группу контроля. Диагноз АтД был установлен в соответствии с существующими международными критериями для детей [7]. Определение уровней цитокинов: ИЛ 4, ИЛ 5, ИЛ 22, ИЛ 31, ИЛ 33, и трансформирующего ростового фактора TGF-ß1, эотаксина, эотакси-на-2 проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА) с применением наборов фирмы «Bioscience», «Platinum ELISA», США. Оценку результатов осуществляли, используя миркопланшетный ридер Anthos 2020 («Biochrom», Великобритания). Нижний пороговый уровень чувствительности, согласно заявленным производителем значений, составлял для ИЛ 4 1,3 пг/ мл, для ИЛ 5 - 1,5 пг/мл, для ИЛ 22 - 5,0 пг/мл, для ИЛ 31 - 1,0 пг/мл, для ИЛ 33 - 0,2 пг/мл, для TGFß1 - 8,6 пг/мл, для эотаксина < 2,2 пг/мл, и для эотаксина-2 < 2,5 пг/мл. Данное исследование было одобрено Этическим комитетом ОСП «Научно-исследовательский клинический институт педиатрии имени 24 Р оссийский .^Аллергический ^Журнал Профиль цитокинов у детей с атопическим дерматитом. академика Ю.Е. Вельтищева» ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова. Все статистические расчёты проведены с использованием STATISTICA 8.0. Описательная статистика проводилась с вычислением средней величины, медианы, верхнего и нижнего квартилей. Взаимосвязь между концентрациями цито-кинов анализировали вычислением коэффициента корряляции по Спирмену. Сравнение групп осуществляли с применением Манна-Уитни U-теста, построением таблиц сопряжённости с применением критерия Фишера. Различия считали статистически значимыми при уровне р=0,05. Результаты. Диагноз АтД был подтверждён у 64 (100%) пациентов на основании международных критериев Eichenfield et al [7]. Тяжёлое течение АтД было отмечено у 32 (50%) пациентов. На первом этапе исследования была оценена частота встречаемости концентраций цитокинов выше пороговых. Концентрация ИЛ 4 выше пороговой была выявлена у 18 (28%) пациентов, ИЛ 5 - у 15 (23,4%), ИЛ 22 - у 5 (7,8%), ИЛ 31 - у 20 (31,2%), ИЛ 33 - у 0 (0%), эотаксина - у 55 (85,9%), эотаксина-2 - у 63 (98,4%), TGFß1 - у 64 (100%) пациентов. У пациентов группы контроля концентрация ИЛ 5 выше пороговой выявлялась достоверно чаще по сравнению с пациентами с АтД (100 и 23,4%, соответственно, р=0,00001). Значения концентраций определяемых цито-кинов в группе с АтД составили (медиана и верхняя и нижняя квартили): ИЛ 4 - 0 [0; 4, 64] пг/мл; ИЛ 5 - 0 [0; 0] пг/мл; ИЛ 22 - 0 [0; 0] пг/мл; ИЛ 31 - 0 [0; 3, 15] пг/мл; ИЛ 33 - 0 [0; 0] пг/мл; эотаксин - 74,3 [56, 6; 94, 8] пг/мл; эотаксин-2 - 936,8 [563, 1; 1615, 4] пг/мл; TGFß1 - 2,64 [2, 41; 3, 38] пг/мл. При сравнении уровней цитокинов между подгруппами детей с АтД и без наличия атопии выявили, что у детей с АтД достоверно ниже концентрация ИЛ 5 (р=0,0006). На следующем этапе исследования, при анализе взаимосвязи значений концентраций цитоки-нов между собой достоверной корреляции выявлено не было (p>0,05). При сравнении концентрации цитокинов у пациентов с тяжёлым и среднетяжёлым/лёгким АтД достоверных различий не обнаружено. Обсуждение результатов. В данном исследовании был проведен анализ цитокинового спек тра пациентов с АтД. У детей с АтД достоверно реже выявлялась концентрация ИЛ 5 выше пороговой, и значение концентрации данного цитоки-на было достоверно ниже, по сравнению с детьми из группы контроля. Интерлейкину 5 в патогенезе аллергических заболеваний отводится особое место из-за его эозинофилотропного действия. ИЛ 5 вызывает высвобождение эозинофилов из костного мозга, их созревание и активацию. Известно, что при атопическом дерматите отмечается повышенная продукция ИЛ 5 и повышенное содержание его в коже [8]. Полученные в нашем исследовании различия, вероятно, связаны с повышенным потреблением IL-5 (например, взаимодействие IL-5 с рецептором к IL-5 на эффек-торных клетках). Обращает на себя внимание тот факт, что у детей с атопическим дерматитом с наибольшей частотой выявлялись С-С хемокины (эотаксин и эотаксин-2) и TGFß1. Эотаксин и эотаксин-2 являются основными хемоатрактантами эозинофилов в очаг воспаления. Эозинофилия ткани обнаруживается как в острую, так и в хроническую стадию АтД и коррелирует с тяжестью болезни [9]. В нашем исследовании концентрации эотаксина и эотаксина-2 у пациентов с разной степенью тяжести атопического дерматита не различались. Вместе с тем в недавно проведенном исследовании было показано, что концентрации эотаксина и эотаксина-2 выше у взрослых пациентов с АтД. Этот факт указывает на вовлечение в патологический процесс эозинофилов преимущественно у взрослых [3]. Эозинофилия связана не только с тяжестью кожного процесса, но и с такими нарушениями, как эпидермальная гиперплазия [10]. Трансформирующий фактор роста-ß (TGFß) индуцирует «трансформированный» фенотип у нормальных клеток, растущих в культуре (потеря контактного торможения, отделение от субстрата, реорганизация цитоскелета). Продуцентами TGFß служит большое число клеток, включая стромальные, эпителиальные клетки, макрофаги, регуляторные Т-лимфоциты, многие разновидности опухолевых клеток. В литературе описаны провоспалительные свойства TGFß, в исследовании Li A.G. с соавторами было показано, что повышенная экспрессия TGFß приводит к инфильтрации кожи тучными клетками, что в свою очередь способствует развитию кожно- Р оссийский .^Аллергический ^Журнал 25 Варламов Е.Е., Виноградова Т.В., Пампура А.Н. го воспалительного процесса [11]. Кроме того, продемонстрировано повышение уровня TGFß у детей с АтД тяжёлого течения в сочетании с множественной непереносимостью пищевых белков [12]. Следовательно, изменение, как повышение, так и понижение концентрации TGFß, как прогностического маркера течения АтД можно рассматривать, только учитывая ряд других факторов: особенность клинических манифестаций, состояние эпидермального барьера, значения других иммунологических показателей и т.д. Выявление особенностей патогенеза АтД на основании оценки цитокинового профиля и выявление маркеров тяжести течения заболевания может быть крайне перспективным для разработки новых методов лечения АтД, что может существенно повысить эффективность терапии и разработать персонифицированные походы к диагностике и лечению этого хронического заболевания.