Изучение аллергоида из пыльцы берёзы бородавчатой
- Авторы: Кулага О.С.1, Авоян Г.Э.1, Есаулова Д.Р.1, Андреев И.В.1, Нечай К.О.1, Андреев А.И.1, Кичеева К.Б.2, Баклакова О.С.3, Миславский О.В.1, Гегечкори В.И.2, Черченко Н.Г.1, Санков М.Н.1, Топтыгин А.Ю.1, Швец С.М.1, Романова Т.С.1, Латышева Е.А.1, Мартынов А.А.1, Хаитов М.Р.1,4
-
Учреждения:
- Государственный научный центр «Институт иммунологии»
- Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)
- Академия постдипломного образования Федерального научно-клинического центра специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий
- Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова
- Выпуск: Том 19, № 3 (2022)
- Страницы: 328-335
- Раздел: Оригинальные исследования
- Дата подачи: 27.05.2022
- Дата принятия к публикации: 29.06.2022
- Дата публикации: 07.10.2022
- URL: https://rusalljournal.ru/raj/article/view/1549
- DOI: https://doi.org/10.36691/RJA1549
- ID: 1549
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Обоснование. Пыльца берёзы является одним из главных аллергенов в средней полосе России, в Европе, Северной Америке и ряде других регионов. Аллергены, содержащиеся в пыльце берёзы, часто вызывают перекрёстную IgE-реактивность с гомологичными белками пыльцы других деревьев и различных пищевых продуктов. Аллергенспецифическая иммунотерапия в настоящий момент является единственным методом лечения аллергии, воздействующим напрямую на различные звенья патогенеза заболевания, изменяя ответ организма на действие аллергена. Клиническая эффективность аллергенспецифической иммунотерапии достигает 80–90% и выражается уменьшением клинических проявлений и потребности в лекарственных средствах. Аллергоид, в отличие от аллергена, сохраняет иммуногенность, но значительно теряет IgE-связывающую способность, что является более безопасным при аллергенспецифической иммунотерапии.
Цель ― получение аллергоида из пыльцы берёзы бородавчатой (лат. Bétula péndula) путём обработки глутаровым альдегидом.
Материалы и методы. Очищенный аллерген, выделенный из пыльцы путём обезжиривания и водно-солевой экстракции, растворяли в фосфатно-буферном физиологическом растворе pH 7,5 и проводили полимеризацию в 0,1% растворе глутарового альдегида. Стабилизацию проводили раствором боргидрида натрия.
Результаты. После оценки специфической активности с использованием конкурентного иммуноферментного анализа было видно, что у аллергоида IgE-связывающая способность значительно снижена по сравнению с исходным аллергеном.
Заключение. В ходе работы был получен аллерген берёзы бородавчатой. Полученный аллерген содержит мажорные и минорные антигены берёзы бородавчатой (Bet v 1, Bet v 2, Bet v 3, Bet v 6, Bet v 7). На его основе получен аллергоид путём полимеризации глутаровым альдегидом. Полученный аллергоид имеет большую молекулярную массу, а также низкую IgE-связывающую способность в сравнении с исходным аллергеном. В связи с этим данный аллергоид может стать основой для получения новых препаратов аллергенспецифической иммунотерапии.
Ключевые слова
Полный текст
ОБОСНОВАНИЕ
Пыльца берёзы является одним из главных аллергенов в средней полосе России, Европе, Северной Америке и ряде других стран. Аллергены, содержащиеся в пыльце берёзы, часто вызывают перекрёстную IgE-реактивность с гомологичными белками пыльцы других деревьев и различных пищевых продуктов. Клинические проявления данной аллергии разнообразны: аллергический риноконъюнктивит, бронхиальная астма, атопический дерматит, пищевая аллергия. Оральный аллергический синдром на семечковые и косточковые плоды может значительно влиять на качество и образ жизни пациентов с аллергией на пыльцу берёзы [1, 2].
Аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ) в настоящий момент является единственным методом лечения аллергии, который действует на разные звенья патогенеза заболевания, изменяя ответ организма на воздействие аллергена. Клиническая эффективность АСИТ может достигать 90%, выражаясь уменьшением клинических проявлений и потребности в лекарственных средствах [3].
Основным показанием для назначения АСИТ являются респираторные симптомы с подтверждённой IgE-зависимой природой, в то время как изолированный оральный аллергический синдром не является показанием к АСИТ. Однако примерно у 70% пациентов, имеющих перекрёстную пищевую аллергию и получивших АСИТ аллергенами пыльцы берёзы, симптоматика значительно снижается [1, 3].
Использование экстрактов аллергенов для подкожного введения при АСИТ сопровождается значительными рисками, связанными с IgE-опосредованными нежелательными реакциями. Аллергоид, в отличие от аллергена, сохраняет иммуногенность, но значительно теряет IgE-связывающую способность, что делает его более безопасным для использования при АСИТ [4].
Модифицировать аллерген возможно разными способами: полимеризовать, получить сорбированную форму; создать аллерген-IgG-содержащий комплекс; использовать плазмидную ДНК, кодирующую аллерген; применить IgE-связывающие аллергенные гаптены; произвести биотехнологическими приёмами отдельные молекулы аллергенов или их фрагментов. Разнообразие вышеперечисленных методов модификации аллергенов показывает большой интерес учёных-исследователей со всего мира к АСИТ как варианту лечения аллергических заболеваний.
Жёсткая и стабильная структура аллергоида, которая гораздо более устойчива к воздействию денатурирующих агентов, в отличие от первоначального аллергена продлевает индукцию синтеза антител аллергоидом. За счёт стабильности молекулы, при которой она медленнее разрушается в организме, появляется пролонгированное действие, что, несомненно, является важным достоинством, так как позволяет сделать режим введения более удобным для пациента. Уменьшение общего числа активных антигенных детерминант при взаимодействии с альдегидными группами и сокрытие внутри высокомолекулярного соединения делает их недоступными для IgE-антител и в итоге приводит к снижению аллергенности в полимеризованных аллергенах. Именно это снижение аллергенности делает использование аллергоида безопасным, минимизируя риск развития анафилаксии. Увеличение молекулярной массы и получение жёстких межмолекулярных связей оказывает положительное влияние на иммуногенность [5–7].
Цели исследования ― после получения очищенного аллергена из пыльцы берёзы бородавчатой (лат. Bétula péndula) изготовить аллергоид методом глутарирования. Провести оценку свойств полученного аллергоида.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объект исследования: пыльца берёзы бородавчатой, собранная в 2020 году в период цветения. Остаточная влажность после высушивания 3±0,5%. Пыльцу характеризовали по морфологическим признакам (диаметр пыльцевого зерна, структура экзимы, форма пыльцевого зерна). Допускалось не более 10% примесей других видов пыльцы (определялось микроскопическим способом). Содержание тяжёлых металлов в сульфатной золе из 1 г пыльцы (точная навеска) не более 0,001%. Заражённость растительной пыльцы амбарными вредителями не превышала I степени чистоты (что отвечает требованиям). Все показатели отвечали требованиям Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания.
После обезжиривания пыльцы диэтиловым эфиром раствор фильтровали и высушивали с помощью складчатого фильтра. Далее проводили водно-солевую экстракцию раствором бикарбоната аммония. Полученный экстракт центрифугировали, собирали надосадочную жидкость и последовательно пропускали через фильтры с различным диаметром пор. Затем проводили диализ надосадочной жидкости против апирогенной воды. Диализат повторно центрифугировали и выполняли стерилизующую фильтрацию. Полученные аллергены лиофильно высушивали и использовали в дальнейших исследованиях [8]. Очищенный аллерген растворяли в фосфатно-буферном физиологическом растворе (phosphate-buffered saline, PBS) рН 7,5 и проводили полимеризацию в 0,1% растворе глутарового альдегида. Реакционную смесь инкубировали сутки при температуре 8–10°С, периодически перемешивая. Полученный раствор аллергоида по окончании срока инкубации стабилизировали раствором боргидрида натрия в течение 2 ч при комнатной температуре, затем диализовали против апирогенной воды на холоде в течение 24 ч. Диализат центрифугировали и проводили стерилизующую фильтрацию. Полученный аллергоид лиофильно высушивали и использовали в дальнейших исследованиях.
Хроматографический анализ аллергенов берёзы бородавчатой выполняли с помощью хроматографической системы среднего давления FPLC Pharmacia Biotech (Швеция). Использовали колонку Superdex 200HR 10×30, предварительно откалиброванную по белкам с известной молекулярной массой (IgG 150 кДа, бычий сывороточный альбумин 66 кДа, пероксидаза хрена 44 кДа). Скорость потока 0,5 мл/мин; детектирование при 280 нм, объём образца 0,2 мл.
По методу Лэмли в полиакриламидном геле был проведён электрофорез [9]. По методу Лоури (метод А) определили белок [10].
С помощью конкурентного иммуноферментного анализа (ИФА) определяли специфические IgE-антитела человека. Постановка проводилась с использованием набора реагентов «АллергоИФА-специфические IgE» компании «АлкорБио» (Россия), необходимого для количественного определения в сыворотке крови человека специфических IgE. В данном наборе сорбция моноклональных антител против IgE человека была проведена на твёрдой фазе (планшет для ИФА).
В авторской модификации (внесение исследуемого аллергена в конкуренции с биотинилированным аллергеном) провели конкурентный анализ. В каждую лунку планшета было внесено по 50 мкл пулированной сыворотки лиц с высокой сенсибилизацией к исследуемому аллергену. Далее вносили 50 мкл исследуемого препарата в заданных количествах (5,000; 2,500; 1,250; 0,625; 0,31 и 0,155 мкг/лунка) и 50 мкл коммерческого биотинилированного аллергена берёзы. Исследуемый препарат ― испытуемый аллерген, разведённый на фосфатном солевом буфере (Sigma, США). В контрольную лунку были внесены только 50 мкл биотинилированного аллергена и 50 мкл фосфатного солевого буфера (Sigma).
После выдерживания на шейкере в течение 1 ч при температуре 37±3°С пятикратно промывали раствором для промывания. Далее вносили в каждую лунку по 150 мкл конъюгата (стрептавидин-пероксидаза хрена, Имтек, Россия). Снова выдерживали на шейкере в течение 1 ч при температуре 37±3°С и пятикратно промывали раствором для промывания. В конце вносили в каждую лунку по 100 мкл готового раствора ТМБ (тетраметилбензидин и субстратный буфер, 1:10) и выдерживали на шейкере 15 мин при температуре 37±3°С. Реакцию останавливали стоп-реагентом (серной кислотой). Результат продуктов ферментативной реакции определяли через оптическую плотность с помощью многоканального спектрофотометра Multiscan (Thermo Fisher Scientific Oy, Финляндия) при длине волны 450 нм.
РЕЗУЛЬТАТЫ
С помощью электрофореза в диссоциирующих условиях в 15% полиакриламидном геле был получен белковый профиль пыльцы (рис. 1). В первом столбце показан контроль с известной молекулярной массой, во втором ― антигены берёзы (Bet v 1, Bet v 2, Bet v 3, Bet v 6, Bet v 7).
Рис. 1. Исследование аллергена, выделенного из пыльцы берёзы бородавчатой, с помощью электрофореза в диссоциирующих условиях.
По результатам иммуноблоттинга мы видим две выраженные полосы, соответствующие Bet v 6 (~35 кДа), и группу Bet v 1 / Bet v 2 / Bet v 7 (~17 кДа); рис. 2.
Рис. 2. Результаты исследования методом иммуноблоттинга.
Результаты исследования аллергена и аллергоида методом гель-хроматографии, представленные на рис. 3, демонстрируют, что в результате полимеризации произошло значительное увеличение молекулярной массы аллергоида в сравнении с исходным аллергеном.
Рис. 3. Результаты исследования аллергена (а) и аллергоида (b) берёзы бородавчатой методом гель-хроматографии.
В таблице приведены значения оптической плотности колориметрической реакции при 450 нм (ОП450) в конкурентном ИФА (в числителе) и процент ингибирования (в знаменателе). Использование данного метода даёт возможность оценить способность препаратов аллергена и аллергоида связываться с IgE, что позволяет выявить различия в специфической активности образцов. Согласно результатам оценки специфической активности в конкурентном ИФА, 55,19% ингибиции аллергоида берёзы (АДБ) мы достигли даже при концентрации 5 мкг/лунке, а 55,7% ингибиции аллергена берёзы (АНБ) ― только при 0,155 мкг/лунке, т.е. продемонстрировано значительное (примерно в 32 раза) снижение IgE-связывающей способности АДБ.
Таблица. Анализ конкурентного связывания АНБ, АДБ (по изменениям параметров оптической плотности) в зависимости от концентрации при конкуренции с биотинилированным аллергеном к пыльце берёзы
Table. Analysis of the competitive binding of ANB, ADB (by changes in optical density parameters), depending on the concentration, in competition with a biotinylated allergen to birch pollen
Исследуемый препарат | ОП450/ Ингибирование, % | ||||||
Количество препарата, мкг/лунка | |||||||
0 | 0,155 | 0,31 | 0,625 | 1,25 | 2,5 | 5 | |
Аллерген | 1,386 | 0,614/55,7 | 0,387/72,08 | 0,169/87,81 | 0,121/91,27 | 0,091/93,43 | 0,069/95,02 |
Аллергоид | 1,386 | 1,225/11,62 | 1,180/14,86 | 1,055/23,88 | 0,921/33,55 | 0,795/42,64 | 0,765/55,19 |
Примечание. АНБ ― аллерген берёзы; АДБ ― аллергоид берёзы.
Note: ANB — allergen of birch; ADB — allergoid of birch.
ОБСУЖДЕНИЕ
С помощью экстракции из образцов пыльцы берёзы был получен препарат аллергена, который послужил основой для создания аллергоида. Белковый профиль пыльцы демонстрирует наличие мажорных и минорных антигенов берёзы бородавчатой, связанных с развитием аллергий. При этом антигены Bet v 1, Bet v 2 и Bet v 7 слабо разрешаются электрофорезом и визуализируются как одна широкая полоса.
Немаловажно было продемонстрировать снижение IgE-связывающей способности аллергоида по сравнению с аллергеном пыльцы берёзы, что и было сделано в конкурентном ИФА с использованием пулированной специфической IgE-содержащей сыворотки крови пациентов, сенсибилизированных к исследуемому аллергену. Аллергоид, изготовленный методом глутарирования из очищенного аллергена пыльцы берёзы бородавчатой, продемонстрировал в конкурентном ИФА снижение IgE-связывающей способности. Благодаря этому мы можем сделать вывод, что использование данного аллергоида значительно снижает возможные анафилактические реакции.
Увеличение молекулярной массы аллергоида сыграло ключевую роль в снижении IgE-связывающей способности препарата, а точнее, в уменьшении общего числа активных антигенных детерминант при сокрытии внутри высокомолекулярного соединения и взаимодействии с альдегидными группами, сделав их недоступными для IgE-антител.
Полученный аллергоид из пыльцы берёзы бородавчатой показал хорошие результаты; для подтверждения перспективы его использования в иммунотерапии необходимы доклинические исследования иммуногенности препарата в экспериментальных моделях на грызунах.
Перспектива применения глутаральдегида для полимеризации аллергенов была неоднократно продемонстрирована многими российскими и зарубежными исследованиями, которые показали сохранность или усиление иммунного ответа на введение аллергоидов [2, 4, 11].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
АСИТ является основным методом лечения IgE-опосредованных аллергических заболеваний. Терапия инъекционными формами аллергенов, содержащими экстракты, сопряжена с риском развития анафилактических реакций, что существенно ограничивает популяцию пациентов, которым данный метод лечения может быть применён. Появление препаратов для сублингвальной иммунотерапии отчасти решило эту проблему, так как риск развития анафилаксии при данном пути введения аллергена минимален. Однако сублингвальная иммунотерапия предполагает ежедневный приём аллергена в течение длительного времени (для пыльцевых аллергенов период лечения составляет 4–6 мес в течение 3–5 лет), что снижает приверженность к терапии. Кроме того, заболевания ротовой полости (парадонтоз, рецидивирующий стоматит, период активной смены зубов и др.) или планируемые стоматологические манипуляции приводят к тому, что часть пациентов отказывается от данного вида лечения.
Снижение аллергенности препаратов для АСИТ является актуальной задачей в настоящий момент. Аллергоид может стать прекрасной альтернативой в связи с удобной схемой использования при высоком профиле безопасности. Аллергоиды, сохранившие иммуногенность, но потерявшие аллергенность, имеющие удобный режим введения с минимальным вмешательством в социальную активность пациентов, позволяют значительно увеличить количество пациентов, получающих АСИТ.
Полученный аллерген содержит мажорные и минорные антигены берёзы бородавчатой (Bet v 1, Bet v 2, Bet v 3, Bet v 6, Bet v 7). На его основе получен аллергоид путём полимеризации глутаровым альдегидом. Полученный аллергоид имеет большую молекулярную массу, а также низкую IgE-связывающую способность в сравнении с исходным аллергеном. В настоящий момент проводится дальнейшее изучение свойств полученного аллергоида из пыльцы берёзы, в частности иммуногенности, что будет отражено в следующей работе в ходе дальнейших исследований.
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Источник финансирования. Исследование проводили в рамках госзадания ФМБА по теме «Разработка технологий, создание и испытание противоаллергических лекарственных препаратов» (шифр: «Аллергобиотехнологии-16»).
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией). Вклад распределён следующим образом: О.С. Кулага — получение аллергоида берёзы бородавчатой, проведение конкурентного иммуноферментного анализа; Г.Э. Авоян — получение аллергоида берёзы бородавчатой, проведение конкурентного иммуноферментного анализа; Д.Р. Есаулова — анализ литературных источников, написание и редактирование текста статьи; получение аллергоида берёзы бородавчатой; И.В. Андреев — дизайн исследования, проведение иммуноблоттинга, получение аллергоида берёзы бородавчатой; К.О. Нечай — написание и редактирование текста статьи, получение аллергоида берёзы бородавчатой; А.И. Андреев — проведение электрофореза в полиакриаламидном геле, проведение иммуноблоттинга, получение аллергена берёзы бородавчатой; К.Б. Кичеева — сбор пыльцы берёзы бородавчатой, получение аллергена берёзы бородавчатой; О.С. Баклакова — сбор клинического материала; О.В. Миславский — проведение конкурентного иммуноферментного анализа; В.И. Гегечкори — организация сбора пыльцы берёзы бородавчатой; Н.Г. Черченко — проведение хроматографического анализа; М.Н. Санков — сбор литературных данных; А.Ю. Топтыгин — проведение хроматографического анализа; С.М. Швец, Т.С. Романова — сбор и анализ клинического материала; Е.А. Латышева — дизайн исследования, сбор и анализ клинического материала; А.И. Мартынов — концепция и дизайн исследования; М.Р. Хаитов — концепция, организация и дизайн исследования.
ADDITIONAL INFORMATION
Funding source. The study was conducted within the framework of the FMBA state task on the topic “Development of technologies, creation and testing of anti-allergic drugs” (code: “Allergobiotechnologies-16”).
Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.
Authors’ contribution. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work. The contribution is distributed as follows: O.S. Kulaga — conducting competitive enzyme-linked immunosorbent assay, obtaining the allergoid of the silver birch; G.E. Avoyan — conducting competitive enzyme-linked immunosorbent assay, obtaining the allergoid of the silver birch; D.R. Esaulova — analysis of literary sources, writing and editing the text of the article, obtaining the allergoid of the silver birch; I.V. Andreev — design of the study; conducting immunoblotting, obtaining the allergoid of the silver birch; K.O. Nechay — writing and editing the text of the article, obtaining the allergoid of the silver birch; A.I. Andreev — conducting polyacrylamide gel electrophoresis, conducting immunoblotting, obtaining the allergen of the silver birch; K.B. Kicheeva — collecting the pollen of silver birch, obtaining the allergen of the silver birch; O.S. Baklakova — collection of clinical material; O.V. Mislavsky — conducting competitive enzyme-linked immunosorbent assay; V.I. Gegechkori — organization of the collection the pollen of silver birch; N.G. Cherchenko — conducting chromatography; M.N. Sankov — collection of literary sourses; А.Yu. Toptygin — conducting chromatography; S.M. Shvets, T.S. Romanova — collection and analysis of clinical material; E.A. Latysheva — design of the study; collection and analysis of clinical material; А.I. Martynov — concept and design of the study; M.R. Khaitov — concept, organization and design of the study.
Об авторах
Ольга Сергеевна Кулага
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: olga.surova.94@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1675-3691
SPIN-код: 4736-2614
Россия, Москва
Гаяне Эммануиловна Авоян
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: avoyan.gayane@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4428-0801
SPIN-код: 7196-4339
Россия, Москва
Дарья Ростиславовна Есаулова
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: esaulova.d.r@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-0283-5637
SPIN-код: 4399-8631
MD
Россия, МоскваИгорь Владимирович Андреев
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Автор, ответственный за переписку.
Email: iva66@list.ru
ORCID iD: 0000-0001-6162-6726
SPIN-код: 8072-9669
к.м.н.
Россия, МоскваКсения Олеговна Нечай
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: xenya.ne4ay2016@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-6052-9721
SPIN-код: 7206-6660
Россия, Москва
Александр Игоревич Андреев
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: cahek_ahdreeb@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6257-6289
SPIN-код: 7126-4748
Россия, Москва
Карина Басанговна Кичеева
Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)
Email: kicheeva2001@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-3328-1403
Россия, Москва
Ольга Сергеевна Баклакова
Академия постдипломного образования Федерального научно-клинического центра специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий
Email: olbakserg@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0066-3096
SPIN-код: 8424-2189
MD
Россия, МоскваОлег Владимирович Миславский
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: mislavsky.oleg@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-9996-5050
SPIN-код: 6862-2135
к.фарм.н.
Россия, МоскваВладимир Ираклиевич Гегечкори
Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)
Email: gegechkori_v_i@staff.sechenov.ru
ORCID iD: 0000-0001-8437-1148
SPIN-код: 8964-0804
к.фарм.н., доцент
Россия, МоскваНиколай Георгиевич Черченко
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: cherchenk-o@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5714-0045
SPIN-код: 4437-9547
к.б.н.
Россия, МоскваМихаил Николаевич Санков
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: sankov_m54@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4969-1626
SPIN-код: 4258-1796
к.б.н.
Россия, МоскваАндрей Юрьевич Топтыгин
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: atop2007@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-4232-0670
SPIN-код: 5282-9472
к.м.н.
Россия, МоскваСветлана Михайловна Швец
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: smshvets@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-9642-4016
SPIN-код: 9954-8252
к.м.н.
Россия, МоскваТатьяна Сергеевна Романова
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: ts_romanova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3350-3811
SPIN-код: 8027-8625
к.м.н.
Россия, МоскваЕлена Александровна Латышева
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: ea.latysheva@nrcii.ru
ORCID iD: 0000-0002-1606-205X
SPIN-код: 2063-7973
д.м.н.
Россия, МоскваАлександр Александр Мартынов
Государственный научный центр «Институт иммунологии»
Email: immune48@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9761-8058
SPIN-код: 5829-5580
к.м.н.
Россия, МоскваМуса Рахимович Хаитов
Государственный научный центр «Институт иммунологии»; Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова
Email: mr.khaitov@nrcii.ru
ORCID iD: 0000-0003-4961-9640
SPIN-код: 3199-9803
д.м.н., профессор, член-корреспондент РАН
Россия, Москва; МоскваСписок литературы
- Biedermann T., Winther L., Till S.J., et al. Birch pollen allergy in Europe //Allergy. 2019. Vol. 74, N 7. Р. 1237–1248. doi: 10.1111/all.13758
- Geroldinger-Simic M., Zelniker T., Aberer W., et al. Birch pollen-related food allergy: Clinical aspects and the role of allergen-specific IgE and IgG4 antibodies // J Allergy Clin Immunol. 2011. Vol. 127, N 3. Р. 616–622. doi: 10.1016/j.jaci.2010.10.027
- Kleine-Tebbe J., Zuberbier T., Werfel T., et al. Is allergy immunotherapy with birch sufficient to treat patients allergic to pollen of tree species of the birch homologous group? // Allergy. 2020. Vol. 75, N 6. Р. 1327–1336. doi: 10.1111/all.14130
- Heldner A., Alessandrini F., Russkamp D., et al. Immunological effects of adjuvanted low-dose allergoid allergen-specific immunotherapy in experimental murine house dust mite allergy //Allergy. 2022. Vol. 77, N 3. Р. 907–919. doi: 10.1111/all.15012
- Bellanti J.A., Settipane R.A. Sublingual immunotherapy: a procedure whose time has come? // Allergy Asthma Proc. 2007. Vol. 28, N 1. Р. 1–2. doi: 10.2500/108854107779885318
- Курбачева О.М., Павлова К.С., Галицкая М.А. Аллергенспецифическая иммунотерапия. Аналитический обзор современных международных и отечественных позиционных документов // Российский аллергологический журнал. 2017. Т. 14, № 1. С. 24–32. doi: 10.36691/RJA333
- Moingeon P., Hrabina M., Bergmann K.C., et al. Specific immunotherapy for common grass pollen allergies: pertinence of a five grass pollen vaccine // Int Archives Allergy Immunol. 2008. Vol. 146, N 4. Р. 338–342. doi: 10.1159/000121468
- Николаева И.А., Кулага О.С., Авоян Г.Э., и др. Изучение аллергенов берёзы бородавчатой, выделенных из пыльцы, собранной в период с 2008 по 2015 г. // Иммунология. 2019. Т. 40, № 6. C. 50–56. doi: 10.24411/0206-4952-2019-16007
- Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). Москва: Наука, 1981. 288 с.
- Определение белка. Общая фармакопейная статья. ОФС.1.2.3.0012.15. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Москва, 2018. Режим доступа: https://docs.cntd.ru/document/554031266. Дата обращения: 15.04.2021.
- Migneault I., Dartiguenave C., Bertrand M.J., Waldron K.C. Glutaraldehyde: behavior in aqueous solution, reaction with proteins, and application to enzyme crosslinking // Biotechniques. 2004. Vol. 37, N 5. Р. 790–802. doi: 10.2144/04375RV01
Дополнительные файлы
