The features of innate immune system of children with chronic tonsillitis on the base of cytomegalovirus infection

Abstract

Full Text

Хронический тонзиллит (ХТ) у детей является актуальной проблемой из - за высокой частоты встречаемости, развития тяжелых осложнений, проблем подбора комплексной терапии [2, 4]. Связь ХТ с поражением отдельных органов и систем организма крайне разнообразна. Хронический тонзиллит играет роль пускового механизма в сердечно - сосудистом, нейроэндокринном, иммуннопатологическом и метаболическом синдромах. Заболеваемость хроническим тонзиллитом у детей достигла 25% ~i от общей заболеваемости в структуре ЛОР - болезней. В основе формирования хронического инфекционного очага в небных миндалинах всегда лежат два основных патогенетически значимых фактора: недостаточность противо - микробной защиты организма и особые свойства возбудителей заболевания [1, 4]. Последнее время отмечается рост заболеваемости хроническим тонзиллитом на фоне герпес вирусных инфекций [3]. Известно, что вирусные белки непосредственно оказывают иммунодепрессив - 110 Р оссийский.^Аллергический ^Журнал Особенности врожденного противобактериального иммунитета у детей с хроническим тонзиллитом на фоне цитомегаловирусной инфекции ное действие на организм, кроме того герпес вирусы 4 типа (цитомегаловирус или ЦМВ) репродуцируются в лейкоцитах крови, уничтожая их при активной вирусной инфекции. Целью исследования - оценка эффекторных свойств лейкоцитов крови детей с хроническим тонзиллитом на фоне цитомегаловирус - ной инфекции (ЦМВИ). Для выявления особенностей врожденного иммунитета детей с ХТ на фоне ЦМВИ в момент рецидива и в межрецидивный период инфекции обследовано 103 ребенка в возрасте 5 - 11 лет, среди них - 63 мальчиков и 50 девочек. Критериями включения в группу исследования являлось наличие ХТ декомпенсированной формы (по классификации И.Б.Солдатова), декомпенсация проявлялась частыми рецидивами ангин (3 - 5 рецидивов в год). Наличие иных заболеваний ЛОР органов и соматической патологии служило критерием исключения. ЦМВИ подтверждалась данными ПЦР или ИФА. В исследование были включены дети с приобретенной латентной формой после перенесенной острой ЦМВИ (по классификации А.П.Казан - цева и Н.И.Поповой). Группой сравнения служили дети с первичным тонзиллитом в период обострения (21 человек, среди них 12 девочек, 9 мальчиков) и здоровые дети (25 человек, среди них 12 девочек, 13 мальчиков) в возрасте от 5 до 11 лет. В качестве лабораторных показателей противобактериального иммунитета были исследованы фагоцитарные показатели - фагоцитарное число (ФЧ), фагоцитарный индекс (ФИ), эффективность внутриклеточного кил - линга по S.Nielsen [5]. Для оценки распределения свободных радикалов вне - и внутри клетки был использован флюоресцентный метод. Ней - трофилы инкубировали в растворе Хенкса (без фенолового красного, pH 7.4), 15 минут с 10 - 4 М гидроэтидина, отмывали центрифугированием (5минут при 800g и +40C) в избытке раствора Хенкса и окончательно ресуспендировали до концентрации 106кл\мл. После этого клетки стимулировали форболмиристатацетатом (ФМА) 10 - 5М. Образование этидиума из гидроэтиди - на в клетках регистрировали, измеряя интенсивность флуоресценции этидиума при длинах волн l =473нм, l.=610нм на спектрофлуори возб исп - Г ± J г метре MPF - 44 (Perkin - Elmer) в сантиметровых кварцевых кюветах, термостатированных при 37оС. Статистическая обработка данных проводилась стандартными методами, результаты считались достоверными при p<0,01. При исследовании фагоцитарных показателей (ФИ, ФЧ) лейкоцитов крови детей с ХТ на фоне ЦМВИ не было выявлено снижения активности лейкоцитов крови (p>0,01) как в момент рецидива, так и в межрецидивный период по сравнению с показателями здоровых детей. Поглотительная активность лейкоцитов детей с ХТ на фоне герпес вирусной инфекции не нарушена. Однако эффективность внутриклеточного киллинга оказалась достоверно снижена как в острый период по сравнению с группой детей с первичным острым тонзиллитом на 13,5 ±2,0% (р<0,01) и на 21,0±1,0% (р<0,01) по сравнению со здоровыми детьми. Так как активные формы кислорода и азота участвуют в фагоцитозе и продуцируются благодаря различным ферментным системам как вне - клеточно, так и внутриклеточно, на следующем этапе мы оценили активность внутриклеточной продукции свободных радикалов. Для регистрации внутриклеточной продукции свободных радикалов был использован слабо флуоресцирующий краситель гидроэтидин, который окисляется внутри цитоплазмы перекисью водорода и другими активными формами кислорода, давая при этом сильно флуоресцирующее соединение. Было обнаружено, что доля внутриклеточной концентрации кислородных радикалов снижена на 34±4,5% в лейкоцитах детей с ХТ на фоне ЦМВ в момент рецидива и на 18,5±2,0% в период ремиссии (по сравнению со здоровыми детьми). В отличие от обследованных детей с ХТ на фоне ЦМВИ, у детей с первичным острым тонзиллитом снижения внутриклеточной генерации радикалов не выявлено. Из полученных данных мы заключили, что в лейкоцитах детей с ХТ на фоне ЦМВИ выявлено смещение равновесия между внеклеточной и внутриклеточной продукцией микробицидных радикалов с формированием дефицита внутриклеточной составляющей, что приводит к снижению эффективности киллинга бактерий. Данные параметры необходимо учитывать при оценке тяжести течения и подборе препаратов для иммунотропной терапии.