CELL-MEDIATED IMMUNITY AS FACTOR OF BREAST CANCER PROGNOSIS IN MENOPAUSAL WOMEN

Abstract

Full Text

Рак молочной железы (РМЖ) занимает одно из лидирующих положений по заболеваемости и смертности среди онкологических заболеваний у женщин в период менопаузы [5]. Для индивидуализации программ лечения любой патологии, включая РМЖ, необходима информация, как о критериях прогноза заболевания, так и предиктивных факторах эффективности предполагаемого лечения. Наиболее широко используемые факторы прогноза риска смерти при РМЖ касаются, главным образом, непосредственно самой опухоли, но не факторов защиты [2, 4, 6, 7]. Вместе с тем, системе иммунитета принадлежит фундаментальная роль в прогрессии и промоции злокачественной клетки, что частично влияет как на размер опухоли, так и на её метастазирование [1, 3]. В связи с этим, основной целью настоящего исследования явилось изучение неблагоприятных факторов прогноза среди показателей клеточного иммунитета при РМЖ у женщин в период менопаузы. Материал и методы исследования. Для решения поставленной задачи методом случайной выборки в проспективное когортное исследование было включено 98 больных РМЖ (в возрасте 63±9 лет, ИМТ 31,6±4,8 кг/м2, менопауза у всех женщин). Диагноз заболевания устанавливался на основании результатов клинических, биохимических, иммунологических, инструментальных методов исследования. Морфологическое подтверждение диагноза у всех больных РМЖ. Для установления прогностических критериев 5-летней выживаемости проводился сравнительный анализ изучаемых критериев в зависимости от исхода заболевания: отсутствие признаков рецидива заболевания (благоприятный прогноз), смерть пациентки, метастазирование (неблагоприятный прогноз). О состоянии системы клеточного иммунитета свидетельствовала функциональная пролифера-тивная активность лимфоцитов в ответ на ФГА, инсулин, инсулиноподобный фактор роста-1 (ИФР-1). Сенсибилизацию лимфоцитов к мито-гену и антигенам определяли с помощью реакции бласттрансформации лимфоцитов периферической крови (морфологический метод оценки реакции). С помощью этого же метода определялась функциональная активность коротко-живущих супрессорных клеток, простагландин синтезирующих клеток и клеток с рецепторами к гистамину, также обладающих супрессорной активностью. В качестве антигенов использовали человеческий инсулин (Humulin Regular, “Lilly”, Франция), Диналан (Dynalan R3 IGF-1, Dynamic Development Laboratories Co., Ltd.). Для определения пролиферативной активности лимфоцитов к культуре клеток добавлялся ФГА (ФГА P, “Difco” USA) в пороговой дозе 5 мкг на культуру клеток. Для выявления аутоиммунных клеточных реакций в культуру лимфоцитов добавляли инсулин в дозе 0,08 ЕД, диналан - 0,1 мкг. Контролем служила культура, в которую был добавлен физиоло оссиискии ..Аллергический ^Журн 11 Асфандиярова Н.С., Скопин А.С., Демко А.Н., Евдокимова О.В., Коноплева В.И. гический раствор. Значение индекса стимуляции более 1,5 свидетельствовало о наличии сенсибилизации лимфоцитов к антигену. Клетки культивировались при температуре 37° в течение 72 часов (с ФГА) и 96 часов (с антигенами). После культивирования, из осадка готовили мазки и вели подсчет клеток, трансформированных в бластные формы. Полученные результаты обработаны с помощью методов вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента и х2. Результаты исследования представлены в виде их средних значений ± среднеквадратичное отклонение (M±SD). Различие между группами считали статистически значимым при p< 0,05. Результаты и их обсуждение За 5-летний период наблюдения 15 пациенток из 98 скончались (две от причин, не связанных с РМЖ), а у 7 - было выявлено метастазирование. Пятилетняя выживаемость (с учётом всех стадий заболевания) составила 84,7%, что незначительно отличается от аналогичных показателей других исследователей. Различия по возрасту между группами c благоприятным и неблагоприятным прогнозом не отмечено (61,1±10,3 vs. 60,9±8,7, p> 0,05). Гистологическая характеристика опухоли при РМЖ у женщин в период менопаузы примерно одинакова в обеих группах. Исследование размера опухоли показало, что при краткосрочном прогнозе 5-летняя выживаемость значительно выше при размерах опухоли менее 5 см: у больных с благоприятным прогнозом размер опухоли более 5 см встречается лишь у 10% пациенток, в то время как при неблагоприятном прогнозе - более чем у трети пациенток (p<0,01). Различие касается и выявления метастазирования в регионарные лимфатические узлы: N0 отмечена более, чем у 60% пациенток с благоприятным прогнозом, в том время, как в группе больных с неблагоприятным прогнозом лишь пятая часть пациенток не имела метастазов в регионарные л/у. Стадия TNM также оказывает влияние на краткосрочный прогноз: I стадия установлена лишь у одной пациентки с неблагоприятным прогнозом, в то время как III и IV - у половины, в то время как при благоприятном прогнозе III стадия установлена у пятой части пациенток, а пациенток с IV стадией нет. Анализ результатов, полученных при определении критериев выживаемости при изучении самой опухоли подтверждает мнение большинства исследователей, что классические критерии, такие как: размер опухоли, наличие метастазов, регионарные лимфатические узлы на стадии заболевания имеют важное значение в определении прогноза 5-летней выживаемости пациенток [2, 4, 6, 7]. Изучение показателей системы клеточного иммунитета позволило установить следующее: пролиферативная активность лимфоцитов в ответ на ФГА значительно снижена во всех группах и не зависела от исхода патологического процесса: 39,3±16,8% vs. 39,7±17,1%. Видимо, нарушение функции надзора способствовало спасению инициированной злокачественной клетки, развитию патологического процесса, но исход уже не определяло. Функциональная активность короткожи-вущих супрессорных клеток, будучи значительно выше нормальных показателей (p < 0,0001), тем не менее, также мало зависела от исхода: при благоприятном прогнозе индекс супрессии составил 1,27±0,40, при неблагоприятном - 1,35±0,45 (p > 0,05). Различие можно было выявить при изучении функции клеток с рецепторами к гистамину и простагландин синтезирующих клеток, также обладающих супрессорной активностью. При благоприятном прогнозе индекс супрессии составил 0,88±0,22 для простагландин синтезирующих клеток, при неблагоприятном - 0,98±0,16 (p < 0,05): для клеток с рецепторами к гистамину 0,99±0,27 vs. 1,12±0,22 (p < 0,05), соответственно. Не исключено, что высокая супрессорная активность этих клеток обусловливает прогрессирование заболевания. Изучение функции CD4+CD25+FOXP3+-клеток (Treg), также оказывающих супрессорный эффект, проведенных рядом исследователей [3], показало, что опухоли с высоким содержанием этих клеток ассоциируются с большими размерами, высокой степенью гистологической злокачественности, наличием сосудистой инвазии, и отрицательным гормональным статусом. Исследование сенсибилизации лимфоцитов к инсулину и ИФР-1, свидетельствуют о том, что прогностическое значение имеет лишь сенсибилизация лимфоцитов к ИФР-1, супрессирован-ная клетками с рецепторами к гистамину. Про-тективный эффект данного явления был отмечен и ранее, так как он встречается чаще при доброкачественных опухолях молочной железы. 12 Р оссийский .^Аллергический ^Журнал Часто болеющие дети: взгляд врача аллерголога-иммунолога Заключение Критериями благоприятного краткосрочного (5 лет) прогноза при раке молочной железы у женщин в период менопаузы являются размер опухоли менее 5 см, отсутствие метастазов в регионарные лимфатические узлы, а также отсутствие высокой активности супрессорных клеток.