Н.Л. Рябова1, Ю.В. Кузьменко2, В.В. Тютяева2, И.В. Андреев1, М.Н. Санков1, Е.С. Стародубова2, О.В. Преображенская2, А.И. Мартынов1, В.Л. Карпов2

1 ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, г. Москва
2 ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, г. Москва

Ключевые слова: береза повислая, Bet v 2 профилин, иммунорегуляторные сигналы

Цель. Создание рекомбинантных белков, содержащих профилин и сигнальные пептиды, обеспечивающие
протеасомный или лизосомный пути деградации белков.
Материалы и методы. В качестве базового вектора использовали плазмиду pET-Bet v 2, кодирующую ал-
лерген Bet v 2. В данный вектор клонировали два сигнальных пептида: C-концевой фрагмент орнитинде-
карбоксилазы (ODCsig) и N-концевой фрагмент инвариантной цепи человека (Ii). Рекомбинантные белки
нарабатывали в E. сoli штамма BL21(DE3). Рекомбинантный белок очищали с использованием Ni-NTA
агарозы. Оценку иммунологической специфичности рекомбинантных белков проводили иммунофермент-
ным методом c использованием сывороток крови пациентов, страдающих аллергией на пыльцу березы.
Результаты. Для изменения соотношения IgE/IgG ответа аллерген Bet v 2 (профилин) пыльцы березы по-
вислой модифицирован иммунорегуляторными пептидами. Для усиления Th1-ответа использован сигнал
деградации на протеасоме орнитиндекарбоксилазы и для Th2-ответа – сигнал направления в лизосомы
инвариантной цепи человека. Разработана система по наработке препаратов рекомбинантного аллергена
Bet v 2, пригодного для иммунологических тестов. Полученные высокоочищенные препараты химерных
белков эффективно связывали антитела изотипа IgE сывороток крови больных с гиперчувствительностью
к пыльце березы.
Заключение. Были созданы и выделены новые химерные аллергены на основе белка Bet v 2 пыльцы бе-
резы повислой.